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ELISA分析儀器

    ELISA試劑技術(shù)20世紀(jì)80年代引入中國，現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用。與之相關(guān)的分析儀器也得到了快速發(fā)展，我國先后出現(xiàn)了十余家酶標(biāo)儀、洗板機(jī)生產(chǎn)廠商，在中國市場上與眾多的進(jìn)口酶標(biāo)儀器進(jìn)行緊張競爭。下面分三個方面對ELISA中有關(guān)儀器及其在中國的應(yīng)用作一簡要介紹。

    分離式酶聯(lián)免疫儀器

    分離式酶聯(lián)免疫儀器主要有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)。在血清離心之后，經(jīng)過加樣、洗板、孵育等過程，zui后通過吸光度判定結(jié)果。ELISA實(shí)驗(yàn)在國內(nèi)主要用于定性檢驗(yàn)，故目前的分離式儀器基本上可以滿足。

    酶標(biāo)儀本質(zhì)上是一臺于微孔板的、可見光范圍的光電比色計(jì)。在ELISA實(shí)驗(yàn)中，酶標(biāo)儀是測定各微孔中試樣的吸光度的關(guān)鍵儀器，對試驗(yàn)結(jié)果的判定有直接影響，是實(shí)驗(yàn)室*的重要儀器之一。隨著ELISA技術(shù)的普及，酶標(biāo)儀得到了很大發(fā)展，產(chǎn)品種類齊全，型號多樣，各有特色。目前國內(nèi)市場上銷售的酶標(biāo)儀已*擺脫原來的單孔測量方式，整板測量、定性定量計(jì)算、存儲、多種報(bào)告格式、濾光片自動轉(zhuǎn)換等已成為基本的、*的功能，各種新推出的酶標(biāo)儀性能日益完善，功能不斷擴(kuò)充。具體有：

1. 測量高速化  從目前不斷推出的酶標(biāo)儀趨勢來看，整板測量速度均在10s以內(nèi)，這有利于防止測量過程中各微孔吸光度的微小變化，盡可能克服環(huán)境對結(jié)果的影響，同時可以滿足動力測量的要求，測量速度在20s以上的儀器將處于不利于地位。我國現(xiàn)生產(chǎn)的酶標(biāo)儀，測量整板速度一般為25s,產(chǎn)品更新周期較長。
2. 寬吸光度范圍   盡管酶標(biāo)儀A=0-2.5的吸光度范圍*可以滿足實(shí)驗(yàn)的要求，但國外新推出的儀器都擴(kuò)寬了早期型號的吸光度范圍，較的酶標(biāo)儀其線性范圍可以達(dá)到A=4.0，并且保持很好的精密度，如BIORAD公司的Benchmark,在400-750nm、A=0-4.0時其重復(fù)性與線性均不大于3.5%。又如LABYSTEMS公司的Multi-skan Ascent,其吸光度讀數(shù)范圍達(dá)A=0-4.0，在A=3.0-4.0范圍，其線性不超過2%, RSD小于1.0%。
3. 擴(kuò)展到紫外  增加紫外濾光片幾乎是廠商的共同選擇。由于各種酶標(biāo)儀都配有放置濾光片的可自動轉(zhuǎn)換的機(jī)構(gòu)，可以同時安裝6-8片濾光片，擴(kuò)展紫外功能相對容易，一般都增加340nm濾光片。
4. 具有孵育功能  可以自動、控制反應(yīng)溫度，使微孔板的孵育過程在儀器內(nèi)部完成，降低外界干擾，簡化操作步驟。如BIORAD公司的Benchmark,芬蘭LABSYSTEMS公司的Multiskan  Ascent,BIOTCK公司的EIX808等。
5. 具有動力學(xué)檢測功能   常規(guī)ELISA是一種終點(diǎn)法 測量實(shí)驗(yàn)，測量前需要加入終止液來抑制酶免反應(yīng)的進(jìn)行，通過吸光度的大小來計(jì)算待測物質(zhì)的濃度，動力學(xué)方法是通過測定反應(yīng)過程中吸光度的變化速率來計(jì)算相應(yīng)的待測物質(zhì)的含量的，酶標(biāo)儀的測量速度加快后，只要增加相應(yīng)的軟件，就可以使用酶標(biāo)儀完成某些生化指標(biāo)的動力學(xué)測量。

洗板機(jī)是ELISA試驗(yàn)保證洗滌效果、進(jìn)而保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的重要儀器，洗板機(jī)的作用已不再是簡單的代替人的手工勞動的自動化裝置。目前國內(nèi)的洗板機(jī)除提供常規(guī)的設(shè)備清洗次數(shù)、清洗條數(shù)、浸泡時間等基本功能之外，還根據(jù)用戶的需要分別增加了底部沖洗、兩點(diǎn)吸液、板式/條式洗板、震蕩、位置調(diào)節(jié)及自動清洗管路、自動換液存儲多種洗板程序等功能，清洗殘留量由原來的5-6UL/孔減小到2UL/孔，有的洗板機(jī)允許用戶對洗板過程的每一步的流量、時間、位置等進(jìn)行詳盡的設(shè)定。生產(chǎn)廠商根據(jù)各自對洗板技術(shù)的研究，努力提高儀器可靠性與自動化程度，同時為用戶提供一個*的、完善的洗滌環(huán)境。國內(nèi)洗板機(jī)就洗板效果、產(chǎn)品可靠性等主要指標(biāo)已達(dá)到進(jìn)口以前的水平，與進(jìn)口儀器相比，其價格、售后服務(wù)占一定優(yōu)勢，主要差距是無定量加液。

組合式的酶聯(lián)免疫儀器

 組合式的酶聯(lián)免疫儀器分三類：全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)、自動樣品處理系統(tǒng)、流水線作業(yè)式組合系統(tǒng)。前兩者主要用于各大血站、醫(yī)院，后者主要用于試劑生產(chǎn)廠商。

全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)是將ELISA試驗(yàn)中的各個步驟，從加樣、孵育、洗滌、震蕩、閉塞到定性或定量分析、報(bào)告存儲與打印功能全部集成在一臺儀器中，由儀器按用戶事先設(shè)計(jì)的程序自動進(jìn)行。HAMILTON公司的FAME（世界上*臺自動板式ELISA系統(tǒng)）、BIORAD公司的CAA、奧斯邦公司的AMP、TECAN公司的Minilyser、ORGANO公司的TEKTIME、意大利S.P.A. DIVISION  STRUMENTI的PersonaiLAB等全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)已先后進(jìn)入國內(nèi)市場。近兩年新進(jìn)入中國市場還有DYNDRX、公司的DSX、 阿克蘇公司的Flextk2、BIOASIA代理的TRITURUS等。全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)的出現(xiàn)滿足了各大醫(yī)院、血站大批量重復(fù)檢驗(yàn)的要求，提高了這些單位的檢查檢驗(yàn)效率與實(shí)驗(yàn)水平，有效控制了大批量檢驗(yàn)中極有可能出現(xiàn)的人工操作失誤，有利于ELISA實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量保證與提高，其國內(nèi)市場穩(wěn)步增長。

自動樣品處理系統(tǒng)主要用于完成ELISA實(shí)驗(yàn)中的繁瑣無味、人工容易出錯的加樣、稀釋滴定、孵育、洗滌等步驟，完成之后再由酶標(biāo)儀判定結(jié)果。使用自動樣品處理系統(tǒng)利用原有的酶標(biāo)儀，既節(jié)約資金，又實(shí)現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)過程的自動化，是一種很經(jīng)濟(jì)的方案。